Analisa Vitamin C

ANALISA VITAMIN C

Oleh :

Faruq Fajar Sulthon           (121710101117)

Bayu Octavian Prasetya    (121710101118)

TEKNOLOGI HASIL PERTANIAN

FAKULTAS TEKNOLOGI PERTANIAN

UNIVERSITAS JEMBER

2013

BAB 1. PENDAHULUAN

1.1              Latar Belakang

Vitamin adalah suatu senyawa organik yang terdapat di dalam makanan dalam jumlah yang sedikit, dan dibutuhkan dalam jumlah yang besar untuk fungsi metabolisme yang normal. Vitamin dapat larut di dalam air dan lemak. Vitamin yang larut dalam lemak adalah vitamin A, D, E, dan K, dan yang larut dalam air adalah vitamin B dan C (Dorland, 2006).

Vitamin C adalah vitamin yang paling tidak stabil dari semua vitamin dan mudah rusak selama pemrosesan dan penyimpanan. Laju perusakan meningkat karena kerja logam, terutama tembaga dan besi, dan juga oleh kerja enzim. Pendedahan oksigen, pemanasan yang terlalu lama dengan adanya oksigen, dan pendedahan terhadap cahaya semuanya merusak kandungan vitamin C makanan. Enzim yang mengandung tembaga atau besi dalam gugus prostetiknya merupakan katalis yang efisien untuk penguraian asam askorbat.  Asam L-askorbat (vitamin C) adalah lakton (ester dalam asam hidroksikarboksilat) dan diberi ciri oleh gugus enadiol, yang menjadikannya senyawa pereduksi yang kuat (Deman, 1997).

Berbagai macam analisis dilakukan untuk mengetahui kadar vitamin C. Penelitian dengan menggunakan metode spektrofotometri dilakukan pada tahun 1966 sampai dengan tahun 1967. Pada spektrofotometri, sample (vitamin C) diletakkan pada kuvet yang disinari oleh gelombang yang memiliki panjang gelombang yang mampu diserap oleh molekul asam askorbat (Helrich, 1990).

Analisis Vitamin C juga dilakukan dengan metode titrasi 2,6 D (Dichloroindophenol) yang dimulai pada tahun 1964 dan berakhir pada tahun 1966. Pada titrasi ini, persiapan sampel ditambahkan asam oksalat atau asam metafosfat, sehingga mencegah logam katalis lain mengoksidasi vitamin C (Helrich, 1990).

Metode spektrofotometri dan titrasi 2,6 D (Dichloroindophenol) jarang dilakukan karena memerlukan biaya yang mahal, titrasi lain yang dapat dilakukan adalah titrasi Iodium. Metode ini paling banyak digunakan, karena murah, dan tidak memerlukan peralatan laboratorium yang canggih. Titrasi ini memakai Iodium sebagai oksidator yang mengoksidasi vitamin C dan memakai amilum sebagai indikatornya. Kekurangan dari metode ini yaitu ketidakakuratan nilai yang diperoleh karena vitamin C dapat dipengaruhi oleh zat lain (Wijanarko, 2002).

Titrasi Iodium adalah salah satu metode analisis yang dapat digunakan dalam menghitung kadar Vitamin C. Dimana, suatu larutan vitamin C (asam askorbat) sebagai reduktor dioksidasi oleh Iodium, sesudah vitamin C dalam sampel habis teroksidasi, kelebihan Iodium akan segera terdeteksi oleh kelebihan amilum yang dalam suasana basa berwarna biru muda. Kadar vitamin C dapat diketahui dengan perhitungan 1ml 0,01 N larutan Iodium = 0,88 mg asam askorbat (Wijanarko , 2002).

Terdapat beberapa metode untuk mengetahui kadar vitamin C pada suatu bahan pangan. Diantaranya adalah metode titrasi dan metode spektrofotometri. Metode titrasi dapat terdiri dari metode titrasi iodium, Metode Titrasi 2,6 D (Dichloroindophenol), dan Titrasi Asam-Basa.

a.         Iodium

Metode ini paling banyak digunakan, karena murah, sederhana, dan tidak memerlukan peralatan laboratorium yang canggih. titrasi ini memakai Iodium sebagai oksidator yang mengoksidasi vitamin C dan memakai amilum sebagai indikatornya (Wijanarko, 2002).

b.         Metode Titrasi 2,6 D (Dichloroindophenol)

Metode ini menggunakan 2,6 D dan menghasilkan hasil yang lebih spesifik dari titrasi yodium. Pada titrasi ini, persiapan sampel ditambahkan asam oksalat atau asam metafosfat, sehingga mencegah logam katalis lain mengoksidasi vitamin C. Namun, metode ini jarang dilakukan karena harga dari larutan 2,6 dan asam metafosfat sangat mahal (Wijanarko, 2002).

c.         Titrasi Asam-Basa

Titrasi Asam Basa merupakan contoh analisis volumetri, yaitu, suatu cara atau metode, yang menggunakan larutan yang disebut titran dan dilepaskan dari perangkat gelas yang disebut buret. Bila larutan yang diuji bersifat basa maka titran harus bersifat asam dan sebaliknya. Untuk menghitungnya kadar vitamin C dari metode ini adalah dengan mol NaOH = mol asam Askorbat (Sastrohamidjojo,2005).

Untuk metode spektrofotometri larutan sampel (vitamin C) diletakkan pada sebuah kuvet yang disinari oleh cahaya UV dengan panjang gelombang yang sama dengan molekul pada vitamin C yaitu 269 nm. Analisis menggunakan metode ini memiliki hasil yang akurat. Karena alasan biaya, metode ini jarang digunakan (Sudarmaji, 2007).

1.2              Tujuan

·         Mengetahui prosedur metode titrasi iodin

·         Mengetahui reaksi yang terjadi dan banyaknya kandungan vitamin C pada bahan

BAB 2. BAHAN DAN PROSEDUR ANALISA

2.1       Alat dan Bahan

2.1.1    Alat

·         Neraca Analitik

·         Spatula Kaca

·         Beaker Glass

·         Spatula Besi

·         Botol Sentrifuge

·         Stirer

·         Labu Takar 100 ml

·         Biuret

·         Pipet Volum

·         Corong

·         Pisau

·         Sentrifuge

2.1.2    Bahan

·           5 Buah Jeruk

·           Tissue

·           Label

·           Aquades

·           Kertas Saring

·           Iodin

·           Larutan Pati

2.1.3    Pembuatan Reagen Iodin

Pembuatan larutan standar iodium 0.1 N. Pertama timbang 2,5 g kristal KI (kalium iodida) kemudian larutkan  dalam 25 ml aquades. Selanjutnya timbang 12,7 g kristal I2 (iodin) dan masukkan dalam larutan KI sedikit demi sedikit hingga semuanya larut (dimasukkan dalam botol tertutup dan dikocok). Setelah iodin larut pada larutan KI, tera menggunakan aquadest sampai 1000 ml pada labu ukur. Untuk mendapatkan iodin dengan konsentrasi 0,01 N dilakukan dengan pengenceran larutan iodin 0,1 N yaitu dengan mengambil 0,1 ml dari 100ml iodin 0,1 N dan ditera kedalam 100 ml.

2.3       Prosedur Analisa

200-300 gram sampel

Blender hingga terbentuk bubur

Ambil 10-30 gram

Stirer 10-15 menit

+ 50 ml aquades

Disaring pada labu takar 100 ml

Ambil 25 ml

+ 2 ml larutan pati

Titrasi dengan iodium 0,01 N

Sentrifus 10 menit

BAB 3. HASIL DAN PEMBAHASAN

3.1       Hasil Analisa

Sampel   : Jeruk

Ulangan	Berat Botol	Berat Sampel	Beaker + Sampel	Sampel	Skala Awal	Skala Akhir	ml titrasi
1	71,924	19,1	91,0249	Pengulangan 1	3,6	5,8	2,2
				Pengulangan 2	5,8	8,2	2,4
				Pengulangan 3	8,2	10,7	2,5
2	67,173	20,0	87,112	Pengulangan 1	10,7	12,6	1,9
				Pengulangan 2	12,5	15,2	2,7
				Pengulangan 3	15,2	18,1	2,9

Ø  Perhitungan Kadar Vitamin C =

Ø  Keterangan:     N = Normalitas Iodium = 0,01 N

                                    FP = Faktor Pengali =  = 2

Sampel  Ulangan1

Kadar Vitamin C =  =  = 81,089 mg/100 gr

Kadar Vitamin C =  =  = 88,460 mg/100 gr

Kadar Vitamin C =  =  = 92,146 mg/100 gr

Rata-rata =  =  = 87,231

SD =

SD  =

         =

         =

         =

         = 5,629

RSD =  =  = 6,45%

Sampel  Ulangan 2

Kadar Vitamin C =  =  = 66,88 mg/100 gr

Kadar Vitamin C =  =  = 95,04 mg/100 gr

Kadar Vitamin C =  =  = 102,08 mg/100 gr

Rata-rata =  =  = 88

SD =

SD  =

         =

         =

         =

         = 18,626

RSD =  =  = 21,165%

3.2       Fungsi Perlakuan

Langkah awal dalam persiapan bahan yaitu memeras 5 buah jeruk agar cairannya keluar untuk memudahkan analisis. Kemudian timbang masing-masing 20 ml pada 2 beaker glass. Fungsi dari penimbangan 2 beaker glass adalah sebagai pengulangan agar dapat dibandingkan antara sampel pengulangan pertama dengan pengulangan kedua untuk melihat akurasinya. Tambahkan 50 ml aquades pada masing-masing beake glass. Tujuan penambahan aquades adalah untuk mengekstrak Vitamin C pada larutan jeruk. Setelah itu masukkan larutan jeruk dengan aquades tersebut kedalam botol stirrer kemudian di stirrer selama 10-15 menit. Stirer bertujuan untuk mengoptimalkan proses ekstraksi dan agar homogen. Setelah itu di sentrifus 10 menit, sentrifus bertujuan untuk memisahkan partikel yang kecil dan besar atau padatan sehingga partikel yang besar nantinya akan mengendap dan partikel yang kecil akan disaring. Selanjutnya dilakukan penyaringan untuk memisahkan padatan yang masih tertinggal.

Ambil sampel yang sudah disaring pada masing-masing pengulangan sebanyak 25 ml kedalam 3  labu takar. Tambahkan 2 ml larutan pati ke dalam labu takar. Penambahan larutan pati yaitu sebagai indikator dalam titik akhir titrasi. Langkah terakhir yaitu titrasi dengan iodin 0,01 N tujuannya agar Vitamin C bereaksi dengan iodin, ketika Vitamin C yang berikatan dengan iodin habis maka iodin akan berikatan dengan pati dan membentuk warna ungu. Warna ungu menandakan titik titrasi.

3.3       Pembahasan

Percobaan penetapan kadar vitamin C pada praktikum kali ini dengan menggunakan sampel buah yang mengandung vitamin C yaitu jeruk yang diperas airnya. Fungsi larutan standart yodium ialah pereaksi untuk memperlihatkan jumlah vitamin C yang terdapat dalam sampel menjadi senyawa dehidro askorbat sehingga akan berwarna biru tua karena pereaksi yang berlebih. Fungsi amylum ialah untuk meningkatkan kecepatan percobaan (sebagai indikator). Reaksi ini disebut reaksi IODIMETRI karena terjadi perubahan dari tidak berwarna (bening) menjadi berwarna biru tua, sedangkan reaksi IODOMETRI adalah kebalikannya. Jeruk pada umumnya mengandung 50 mg vitamin C dalam 100 gr bahan.

Proses pengujian untuk sample jeruk dilakukan hanya dengan 1 kali pengenceran yaitu dengan 50 mL aquades, dan dilakukan 6 kali pengujian sehingga saat praktikum dilakukan 6 kali titrasi. Hal tersebut dilakukan agar apabila pada pengujian pertama titran yang di hasilkan terlalu banyak atau sedikit masih ada sampel cadangan untuk memperoleh data pengamatan yang akurat. Setelah dilakukan proses strirer dan sentrifus selanjutnya sample dipipet sebanyak 25 mL dan dimasukan dalam erlenmeyer, kemudian ditambahkan 2 mL amilum/larutan pati sebagai indikator, setelah itu dititrasi dengan menggunakan Iodium 0,01 N.

Proses titrasi dilakukan sampai larutan dalam erlenmeyer berubah warna menjadi biru, warna biru yang dihasilkan merupakan iod-amilum yang menandakan bahwa proses titrasi telah mencapai titik akhir, indikator yang dipergunakan dalam analisa vitamin C dengan metode iodimetri adalah larutan amilum. Jika vitamin C yang berikatan dengan iodin habis maka iodin akan berikatan dengan pati dan membentuk warna ungu. Warna ungu tersebut menandakan titik titrasi, semakin banyak ml titrasi yang dikeluarkan makan semakin tinggi pula kandungan vitamin C yang terdapat dalam larutan bahan.

Reaksi yang terjadi antara iodin dengan atom karbon (C) pada vitamin C dapat dilihat di bawah ini :

Pada sampel ulangan pertama dilakukan 3 kali pengulangan titrasi yang menghasilkan ml titrasi secara berurutan sebanyak 2,2 ml, 2,4 ml, 2,5 ml dan pada sampel ulangan kedua secara berurutan sebanyak 1,9 ml, 2,7 ml, 2,9 ml. Sampel ulangan pertama menghasilkan nilai SD sebesar 5,629 dan nilai RSD sebesar 6,45 %. Sedangkan untuk sampel ulangan kedua menghasilkan nilai SD sebesar 18,626 dan RSD sebesar 21,165 %. Hal ini menunjukan bahwa data yang diperoleh memiliki tingkat keakurasian yang buruk. Karena keakurasian dalam suatu analisa dilihat dari nilai SD dan RSD dengan ketentuan % RSD sesuai standar AOAC (2002) adalah sebagai berikut (1) sangat teliti: % RSD <1,  (2) teliti: % RSD 1 (3) sedang: % RSD 2-5, dan (4) tidak teliti: % RSD >5.

BAB 4. KESIMPULAN DAN SARAN

4.1       Kesimpulan

·           Prinsip analisa kadar vitamin C dengan metode titrasi iodium adalah reaksi vitamin C dengan iodin membentuk ikatan dengan atom C nomor 2 dan 3 sehingga ikatan rangkapnya hilang dan terbentuk kompleks iodium-amilum berwarna biru gelap.

4.2       Saran

·           Sebelum melakukan analisa kadar vitamin, mahasiswa harus benar-benar memahami prosedur kerja agar diperoleh data pengukuran dengan ketelitian yang tinggi dan mendekati keakuratan.

·           Sebaiknya dalam melakukan titrasi, sebelumnya praktikan telah memastikan kondisi buret seperti mengatur kuat tidaknya keran untuk dibuka atau ditutup, sehingga hasil tidak akan kelebihan. Praktikan juga harus lebih teliti melihat awal dan akhir titrasi.

·           Diharapkan semua praktikan dapat melakukan semua acara dalam praktikum agar praktikan lebih paham.

DAFTAR PUSTAKA

Deman, John M. 1997. Kimia Makanan. Bandung : Penerbit ITB

Helrich, Kenneth. 1990. Official Methods Of Analysis Of Association Of Official Analytical Chemist Volume Two. USA : Association Of Official Analytical

Sastrohamidjojo, Hardjono. 2005. Kimia Dasar. Yogyakarta : UGM PRESS

Sudarmaji, Slamet dkk. 2007. Prosedur Analisa Untuk Bahan Makanan dan Pertanian (edisi keempat). Yogyakarta: Liberti

Wijanarko, Simon Bambang. 2002. Analisa Hasil Pertanian. Malang: Universitas Brawijaya